武夷菌素产生菌Fosmid文库的构建及文库探针的获得

• 作者: 孙蕾 张俊 张克诚 杨振娟 檀贝贝 武哲
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: 武夷菌素 基因组 Fosmid文库 文库探针
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 116-121
• 分类号: S482.2
• 字数: 4729字
• 语种: 中文

摘要

以不吸水链霉菌武夷变种CK-15为材料,提取基因组DNA,经Sau 3A Ⅰ部分酶切后回收35-40 kb之间的片段,连接到pCC1FOS载体上,经过包装转染涂布后构建得到了CK-15基因组的Fosmid文库,文库的滴度为8.8×105CFU/mL.随机挑取16个阳性克隆,经EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切电泳分析,样品插入片段平均长度大于35 kb,插入率为100%,符合构建文库的要求.根据多氧霉素、尼克霉素生物合成基因及大环内酯类聚酮合成酶基因(PKS)设计特异性引物,以基因组为模板进行PCR扩增,筛选特异性引物探针.结果用大环内酯类聚酮合成酶基因设计引物扩增出1 693 bp的片段经Blast比对其与大环内酯类抗生素生物合成基因相似性为95%以上.武夷菌素产生菌CK-15 Fosmid文库的构建及文库探针的获得,为武夷菌素生物合成基因的克隆奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙蕾	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	28	295	12.0	16.0
2	张克诚	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	21	308	10.0	17.0
3	武哲	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	3	21	3.0	3.0
4	杨振娟	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	3	14	3.0	3.0
5	檀贝贝	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	3	14	3.0	3.0