山核桃脂肪代谢相关cDNA文库的构建

• 作者: 周秦 曾燕如 黄有军 黄银芝
• 来源期刊: 浙江农林大学学报
• 关键词: 经济林学 山核桃 cDNA文库 SMART 脂肪代谢
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 80-85
• 分类号: S718.46
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-0756.2011.01.013

摘要

山核桃Carya cathayensis 种仁含油量较高,油质多为不饱和脂肪酸.在差异显示反转录-聚合酶链式反应(DDRT-PCR)方法研究山核桃果实成熟时期基因差异表达的基础上,采用SMART(switching mechnism at 5'end of RNAtranscript)技术构建了山核桃脂肪代谢时期的互补脱氧核糖核酸(cDNA)文库.未扩增文库的滴度为5.0×105个噬菌斑形成单位(pfu)·mL-1,插入片段大小为0.7～2.5kb,70.0%的片段超过1.0kb;扩增文库的滴度为5.0x 109 pfu·mL-1,cDNA片段大小均在500bp以上,重组率达94.5%,66.0%的片段超过1.0kb.文库的构建为研究山核桃脂肪代谢机制、调控网络及相关基因的发现提供了条件.图7参19