基于双重微滴数字PCR对转基因玉米Bt11品系定量检测

• 作者: 宋安华 张明明 梁美丹 肖剑 雷燕 黄志深
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 转基因玉米 Bt11品系 双重微滴数字PCR 定量检测
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 研究资源与技术改进
• 页码范围: 543-552
• 页数: 10页
• 分类号: S412
• 字数: 6440字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2020.03.016

摘要

转基因玉米(Zea mays)Bt11是具有抗虫、耐除草剂的转基因玉米品系,目前缺乏对其进行准确定量的检测方法.微滴数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)是近年来新兴的第三代PCR技术,在转基因产品定量领域具有极大的应用前景.为探索微滴数字PCR在转基因植物成分检测中的应用,解决现行转基因食品标准存在的问题,完善我国转基因食品检测监管体系,本研究基于双重微滴数字PCR平台建立转基因玉米Bt11品系及内源基因定量检测方法.选择玉米内源基因Zein及Bt11品系特异性基因Cry1A(b)作为定量靶标序列,从稳定性、特异性、定量线性范围、定量检测低限及准确性分析等方面综合评价双重微滴数字PCR定量检测转基因玉米Bt11品系的方法.实验结果表明,所建立的方法能够实现转基因玉米Bt11品系特异性序列和内源基因的特异性扩增,该方法稳定性好,单位体系内源和外源基因拷贝数在DNA浓度为0.05～10 ng/μL时呈现良好的线性,相关系数R2为0.999;内源和外源基因的定量低限(limit of quantitation,LOQ)分别为11.14和3.96个拷贝,定量准确度试验结果显示相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)在5.68％～10.31％之间,满足小于25％的要求.本研究建立的转基因玉米Bt11品系双重微滴数字PCR定量检测方法特异性强、稳定性好、准确度高、定量范围广,可用于食品中转基因玉米品系成分的定量检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋安华		17	21	3.0	3.0
2	肖剑		23	65	5.0	7.0
3	梁美丹		11	21	2.0	4.0
4	张明明		5	3	1.0	1.0
5	黄志深		2	2	1.0	1.0
6	雷燕		1	0	0.0	0.0