抗病转基因水稻M12及其产品成分的定性、定量PCR检测方法

• 作者: 李鹏 张琳 叶吉妮 贺诗瑶 贾军伟 潘爱虎 唐雪明
• 来源期刊: 作物学报
• 关键词: 品系特异性 定性PCR 定量PCR M12
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
• 页码范围: 949-955
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1006.2018.00949

摘要

通过定性PCR扩增了转基因水稻M12转化体特异性片段和水稻内标基因(sps)片段, 将PCR产物酶切连接后构建到T载体, 得到适于转基因水稻M12品系特异性PCR检测的质粒分子pM12, 建立了事件特异性定性、定量PCR检测方法。定性PCR结果表明, 本方法可特异性检测出M12, 检测限可达100拷贝单倍体水稻基因组; 定量PCR结果表明, M12和sps定量PCR标准曲线R2为0.998和0.997, 扩增效率为95.3%和108.4%, 重复性分析标准偏差范围为0.043~0.276, 定量极限和检测极限可达100和10拷贝。对转基因含量为1.0%的混合样品定量结果的相对偏差在8.0%以内。本研究建立的方法可用于转基因水稻M12及其加工产品成分的检测。