神经干细胞衰老与核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件信号通路的关系

• 作者: 吴奇 王顺和 程霄 向玥 陈粼波 汪子玲 肖含先之 姜蓉 王璐 王亚平
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: D-半乳糖 神经干细胞 衰老 细胞核相关因子2/抗氧化反应原件信号通路 实时定量聚合酶链反应 小鼠
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 神经生物学
• 页码范围: 815-820
• 页数: 6页
• 分类号: R338.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2020.06.002

摘要

目的 建立D-半乳糖(D-gal)诱导小鼠神经干细胞(NSCs)体外衰老模型,探讨NSCs衰老与细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路的关系.方法 取新生C57BL/6J小鼠全脑,分离、鉴定NSCs,培养至第3代,随机分为对照组和衰老组.对照组细胞在NSCs培养基中常规培养48 h,衰老组细胞在对照组基础上加入D-gal(终浓度为10 g/L).细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测NSCs增殖活力;衰老相关p-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色检测衰老阳性神经球百分率;锥虫蓝染色检测细胞存活率;酶标比色法检测细胞培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)与过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量;Western boltting检测NSCs中Nrf2和血红素加氧酶1(HO-1)蛋白表达水平;Real-time PCR检测GCLC和GCLM基因表达水平.结果 与对照组相比,衰老组NSCs增殖活力明显下降,锥虫蓝染色显示,NSCs存活率下降明显,SA-β-gal染色阳性神经球百分率显著上升,SOD活性与CAT活性均显著降低,MDA含量显著升高,NSCs中Nrf2/ARE信号通路相关蛋白Nrf2和HO-1表达水平显著下调,通路相关GCLC和GCLM基因表达下调.结论 采用D-gal可以构建NSCs体外衰老模型,其氧化损伤机制可能与抑制Nrf2/ARE抗氧化信号通路有关.