农杆菌介导高粱成熟胚遗传转化获得耐草甘膦植株

• 作者: 周福平 孙毅 张欢欢 杜建中 段永红 王亦学 王晓清 郝曜山
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 高粱 成熟胚 麦草畏 转基因 农杆菌介导 草甘膦
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 905-912
• 页数: 8页
• 字数: 6276字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2020.05.0905

摘要

利用萌动的成熟胚作外植体进行基因转化,可有效提高高粱转基因材料选育的效率.为了建立并完善以高粱萌动种胚作为外植体的遗传转化体系,本研究以高粱材料Is-623为转化受体,质粒pM3301 UbiSpCP4为外源基因供体,采用农杆菌介导法进行遗传转化,并对转化的关键因素进行分析.结果 表明,麦草畏(dicamba)诱导高粱萌动的成熟胚产生愈伤组织适宜浓度约为5 mg·L-1;农杆菌侵染时间为2h时遗传转化效率较高;经筛选共获得301块抗性愈伤组织,75个转化事件,经PCR、Southern blotting杂交分析、CP4-EPSPS蛋白检测试纸条检测及田间草甘膦耐性鉴定,最终获得草甘膦耐性等级1级株系6株,耐性等级2级株系3株的转基因高粱株系.本研究初步建立了以高粱萌动种胚作为外植体的遗传转化体系,为高粱遗传转化体系的研究和应用奠定了基础.