miR-101通过靶向FGF2抑制非小细胞肺癌的迁移和侵袭

• 作者: 张其程 徐克 曹丽敏 郭雪茹
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: miR-101 非小细胞肺癌 A549细胞 迁移 侵袭 成纤维细胞生长因子2 上皮间质转化 ERK信号通路
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 984-991
• 页数: 8页
• 分类号: R734.2|R730.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385x.2020.09.004

摘要

目的:探究microRNA-101(miR-101)通过靶向成纤维细胞生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)抑制非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞迁移和侵袭的分子机制.方法:采用qPCR法检测人正常肺上皮细胞BEAS-2B和NSCLC细胞系A549、H661和SK-MES-1,以及转染后A549细胞miR-101和FGF2的表达水平.分别将miR-NC、miR-101 mimics、miR-IN-NC、miR-101 inhibitor或pcDNA-3.1空质粒、pcDNA-FGF2转染至A549细胞,运用划痕愈合实验和Transwell小室实验,检测A549细胞中过表达miR-101和FGF2对NSCLC细胞迁移和侵袭能力的影响,采用Western blotting(WB)法检测各组A549细胞中FGF2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、ERK1/2和p-ERK1/2的表达水平.结果:miR-101在NSCLC细胞系中的表达水平明显低于正常肺上皮细胞(均P<0.05),而以A549细胞中表达水平为最低.过表达miR-101可明显抑制A549细胞的迁移(P<0.05)和侵袭(P<0.01),且使细胞中E-cadherin的表达增多(P<0.05)而Vimentin(P<0.05)、N-cadherin(P<0.01)和p-ERK1/2(P<0.05)的表达水平降低.抑制miR-101表达后,可以显著增强A549细胞的迁移和侵袭能力(均P<0.05),引起细胞中E-cadherin表达明显降低而Vimentin、N-cadherin和p-ERK1/2表达水平增高(均P<0.05).采用WB法和双荧光素酶报告基因实验验证了FGF2是miR-101的直接靶基因,且过表达FGF2后显著增强A549细胞的迁移和侵袭能力(均P<0.01),以及减少细胞中E-cadherin的表达(P<0.01)而增加Vimentin(P<0.01)、N-cadherin(P<0.05)和p-ERK1/2(P<0.05)表达水平.与单独过表达FGF2组相比,共同过表达miR-101和FGF2组A549细胞迁移和侵袭能力明显减弱(均P<0.01),其E-cadherin的表达增多(P<0.01)而Vimentin(P<0.01)、N-cadherin(P<0.05)和p-ERK1/2表达水平下降(P<0.01).结论:miR-101通过调控靶基因FGF2抑制NSCLC A549细胞的上皮间质转化(EMT)过程及ERK信号通路,进而抑制NSCLC细胞的迁移和侵袭.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭雪茹		2	1	1.0	1.0
2	张其程		1	0	0.0	0.0
3	曹丽敏		1	0	0.0	0.0
4	徐克		5	8	1.0	2.0