载自杀基因靶向超声分子探针制备及其超声显像的实验研究

• 作者: 张敏 景香香 杨大艳 王明华 谢琳 钟婷婷 陈其青 陈艳
• 来源期刊: 临床超声医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 超声 造影剂 叶酸 靶向 质粒
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 481-485
• 页数: 5页
• 分类号: R445.1
• 字数: 3869字
• 语种: 中文

摘要

目的 制备一种包裹液态氟碳及载肝癌治疗基因质粒,并具有叶酸分子靶向性的纳米级超声分子探针,研究其基本特性及超声显像能力.方法 通过碳乙亚胺法在聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)表面连接叶酸分子,制成靶向膜材料(FA-PLGA)后,采用双乳化法制备载有全氟戊烷(PFP)的纳米级靶向超声造影剂,将其与多聚赖氨酸孵育后,形成表面带正电荷的阳离子,利用正负电荷吸附作用,使纳米粒表面载上目标质粒S-HSV1-TK,得到S-HSV1-TK/PFP@FA-PLGA.使用低强度聚焦超声(LIFU)辐照的方式处理纳米粒,显微镜下观察其相变情况,于超声造影模式下观察其体外显影效果,流式细胞仪检测其连靶率;用PLGA代替FA-PLGA,使用相同方法制备无叶酸的非靶向造影剂,将靶向造影剂和非靶向造影剂分别与肝癌细胞HepG2孵育,观察其体外寻靶能力.结果 成功制备了载有质粒及PFP的纳米级靶向超声造影剂S-HSV1-TK/PFP@FA-PLGA,该纳米粒大小均一,分散性好,平均粒径(200.50±66.34)nm,平均表面电位(37.40±7.08)mV.使用LIFU 5档辐照5 min后,显微镜下可见较多的纳米粒相变,超声造影模式下亦可见显像.流式细胞仪检测纳米粒连靶率约95％;体外细胞实验结果显示该靶向造影剂有明显的靶向作用.结论 本实验成功制备了一种载质粒及PFP的纳米级靶向超声造影剂S-HSV1-TK/PFP@FA-PLGA;该纳米粒可用于超声造影显像,并具有肿瘤靶向性,为研究质粒的转染及肿瘤的治疗奠定了良好基础.