外泌体介导miR-519c-5p增强脂多糖诱导的血管内皮细胞凋亡作用

• 作者: 吕嘉贤 姚纪友 曹璐 朱艳平 童荔 胡晓光 蔡常洁 许静红 黄发
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 外泌体 脓毒症 凋亡 人脐带静脉内皮细胞 miRNA
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 722-728
• 页数: 7页
• 分类号: R319
• 字数: 5970字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2020.06.004

摘要

目的 探讨外泌体介导的miR-519c-5p是否能增强脂多糖诱导的血管内皮细胞凋亡作用.方法 收集大量人脐带静脉内皮细胞(HUVECs)上清液,通过超速离心法制备大量外泌体(exosomes),制备大量无任何处理的blank-exosomes和过表达miR-519c-5p的miR-519c-5p-exosomes;同时予以LPS 10μg/mL刺激HUVECs 6 h构建脓毒症模型,再与分别与上述两种外泌体共培养12 h.实验设立3个组:HUVECs+blank-exosomes为空白组,HUVECs+LPS+blank-exosomes、HUVECs+miR-519c-5p-exosomes为对照组,HUVECs+LPS+miR-519c-5p-exosomes为实验组.通过qRT-PCR法检测miR-519c-5p在外泌体及HUVECs中的表达,通过CCK-8法与流式细胞术分别检测各组内皮细胞增殖和凋亡的情况.结果 经qRT-PCR验证转染的过表达exosomes较blank-exosomes与mimic NC-exosomes miR-519c-5p表达升高约13倍(P<0.001).同时,CCK-8测得实验组OD值均低于空白组和对照组(0.458 vs.1.388,0.458 vs.0.843,P<0.05),流式细胞术测得实验组细胞凋亡比例均高于空白组和对照组(7.197％vs.0.647％,P<0.001;7.197％vs.3.423％,P=0.001).结论 外泌体介导的miR-519c-5p能增强脂多糖诱导的血管内皮细胞凋亡作用.