miR-106b-5p靶向KLF4调控山羊肌内前体脂肪细胞分化

• 作者: 朱江江 杜宇 林亚秋 王永 谢光杰 赵越 马洁琼
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 山羊 miR-106b-5p KLF4 脂肪细胞 荧光素酶活性试验
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 遗传育种
• 页码范围: 1219-1228
• 页数: 10页
• 分类号: S827.2
• 字数: 6309字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2020.06.006

摘要

旨在明确miR-106b-5p对山羊肌内前体脂肪细胞分化的影响,并确定这种作用是通过靶向KLF4来实现的.本研究利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术检测miR-106b-5p在山羊肌内前体脂肪细胞分化过程中的表达模式,通过脂质体转染技术将miR-106b-5p mimic和miR-106b-5p inhibitor转人体外培养的山羊肌内前体脂肪细胞,油红O染色法从形态学验证miR-106b-5p对脂肪细胞中脂滴积聚的影响,qRT-PCR检测预测的靶标基因KLF4和脂肪分化标志基因的表达情况,利用双荧光素酶报告系统鉴定miR-106b-5p与KLF4的靶标关系.qRT-PCR结果显示,miR-106b-5p在山羊肌内前体脂肪细胞诱导分化第3天时表达量最高.在山羊肌内脂肪细胞中干扰miR-106b-5p后油红O染色显示脂滴聚积减少,过表达miR-106b-5p后脂滴聚积增加.在山羊肌内前体脂肪细胞中转染miR-106b-5p inhibitor后PPARγ表达量显著降低(P＜0.05),而KLF4表达量极显著升高(P＜0.01);转染miR-106b-5p mimic后LPL和PPARγ表达量极显著升高(P＜0.01).荧光素酶活性试验结果显示,过表达miR-106b-5p可显著抑制KLF4荧光活性.miR-106b-5p通过靶向并负调节KLF4的表达促进山羊肌内脂肪细胞分化.