具有LXRα活性效应物质的新型筛查方法研究

• 作者: 汤卓衡 胡建英 胡文欣 贾映亭 高俊敏
• 来源期刊: 中国环境科学
• 学科: 地球科学
• 关键词: 肝X受体 重组蛋白 有机磷酸酯 酵母双杂交系统
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 环境毒理
• 页码范围: 3156-3164
• 页数: 9页
• 分类号: X171.5
• 字数: 5149字
• 语种: 中文

摘要

为了检测环境中潜在的LXRα效应物质.本研究以LXRα蛋白为例,利用核受体蛋白与小分子亲和结合的原理,构建了pCold-TF-LXRα重组蛋白并优化了重组蛋白的表达条件,建立了特异性捕获活性物质的方法.结果表明:诱导温度为20℃、诱导剂IPTG浓度为0.4mmol/L为重组蛋白的最佳表达条件;同时,利用LXRα 激动剂T09013174个梯度浓度(0.25,2.5,25,250μg/L)的加标回收率实验测得线性回归曲线为y=0.83604x+0.40763,R2=0.9948,证明方法具有有效性;对比pCold-TF空载体蛋白(6.42％)和重组蛋白(79.83％)对T0901317(250μg/L)的回收率,说明方法具有特异性.为了验证方法的实用性,将重组蛋白与15种典型的有机磷酸酯类化合物(OPEs)的混合标样进行"捕获"实验,证明了TPHP、BPADP、TCrP、EHDPP、TNBP、RDP、TEHP、TDCIPP具有LXRα的活性效应.最后,用酵母双杂交实验验证了这8种OPEs均为LXRα的拮抗剂.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高俊敏	重庆大学三峡库区生态环境教育部重点实验室	33	356	11.0	18.0
2	胡建英	北京大学城市与环境学院地表过程分析与模拟教育部重点实验室	63	1501	23.0	37.0
3	汤卓衡	重庆大学三峡库区生态环境教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0
7	贾映亭	北京大学城市与环境学院地表过程分析与模拟教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0
8	胡文欣	北京大学城市与环境学院地表过程分析与模拟教育部重点实验室	1	0	0.0	0.0