miR-149-5p对变应性鼻炎小鼠Notch1表达和Treg/Th17免疫平衡的影响

• 作者: 唐桥斐 张爽 闫智永
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 变应性鼻炎 miR-149-5p基因 神经源性位点缺口同系物蛋白1 辅助性T细胞17 调节性T细胞 叉头状螺旋转录因子3 维甲酸相关核孤儿受体γt
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 660-667
• 页数: 8页
• 分类号: R765.21
• 字数: 5742字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.2096-8388.2020.06.008

摘要

目的:探讨miR-149-5p对变应性鼻炎(AR)小鼠神经源性位点缺口同系物蛋白1(Notch1)表达和调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)失衡的影响.方法:12只BALB/c小鼠,3只为正常组,余9只小鼠采用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝[Al(OH)3]建立AR模型,再随机均分为模型组(仅造模)、miR-149-5p激动剂对照组(鼻内滴注miR-149-5p agomir阴性对照)及miR-149-5p激动剂组(鼻内滴注miR-149-5p agomir);采用行为学评分考察各组各组小鼠过敏症状、苏木精/伊红染色(HE)分析各组小鼠鼻黏膜病理学变化、实时荧光定量PCR(qPCR)检测各组小鼠鼻黏膜组织miR-149-5p,采用酶联免疫吸附法(ELISA)分析各组小鼠血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)水平,采用蛋白印迹法检测各组小鼠鼻黏膜组织Notch1、维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)及叉头状螺旋转录因子3(Foxp3)蛋白表达;利用miRDB网站预测miR-149-5p与Notch13'-UTR结合位点,构建Notch13'-UTR区野生型(WT)和突变型(MUT)荧光素酶报告载体,转染293T细胞,设置NC+Notch1(MUT)组、miR-149-5p agomir+Notch1(MUT)组、NC+Notch1(WT)组及miR-149-5p agomir+Notch1(WT)组,采用双荧光素酶实验分析并计算荧光素酶相对活性.结果:与模型组比较,miR-149-5p激动剂组小鼠行为学评分明显下降,鼻黏膜炎症反应减轻,上皮结构趋于完整,miR-149-5p的表达显著增加,血清中IgE、IL-6水平下降,IL-10水平升高,Foxp3蛋白的表达增加,Notch1和RORγt蛋白的表达减少(P<0.05或P<0.01);miRDB网站预测miR-149-5p与Notch13'-UTR存在互补位点,双荧光素酶实验结果显示,miR-149-5p ag-omir+Notch1(WT)组的荧光素酶相对活性较NC+Notch1(WT)组降低(P<0.05).结论:miR-149-5p可能通过靶向Notch1调节Foxp3和RORγt蛋白表达,影响Treg/Th17细胞平衡,从而改善AR小鼠鼻部过敏症状.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张爽	沈阳医学院附属第二医院耳鼻喉科	30	82	4.0	8.0
2	唐桥斐	沈阳医学院附属第二医院耳鼻喉科	14	17	3.0	3.0
3	闫智永	沈阳医学院附属第二医院耳鼻喉科	7	6	1.0	2.0