三结构域蛋白21对结肠癌生物学行为的影响

• 作者: 张嘉琦 苏东明 贾佩琦
• 来源期刊: 医学研究生学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结肠癌 三结构域蛋白21 增殖
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1134-1139
• 页数: 6页
• 分类号: R735.35
• 语种: 中文
• DOI: 10.16571/j.cnki.1008-8199.2020.11.003

摘要

目的 目前三结构域蛋白21(TRIM21)在结肠癌中的临床意义及生物功能仍不明确.文中旨在运用慢病毒构建结肠癌HCT116细胞TRIM21基因过表达及低表达细胞株,观察TRIM21对结肠癌生物学行为的影响,采用RNA测序以揭示TRIM21调控结肠癌发生发展的下游分子的影响.方法 收集2019年10月至2020年5月南京医科大学附属逸夫医院20例结肠癌患者的手术切除标本,分别取癌组织及癌旁肠壁组织,进行石蜡切片免疫组化染色.Western blot检测人正常结肠上皮细胞NCM460及人结肠癌细胞HCT116、HT29、SW620的TRIM21表达,分析结肠癌细胞系的TRIM21蛋白表达水平;通过慢病毒载体分别构建TRIM21稳定过表达、稳定低表达的HCT116细胞株模型,将结肠癌细胞分为对照组(过表达空载)、过表达组(转染TRIM21过表达慢病毒)、空载组(低表达空载对照)、低表达组(转染TRIM21低表达慢病毒),Western blot检测构建的模型;磺酰罗丹明B(SRB)实验、克隆形成实验检测24、48、72、96 h细胞增殖,划痕实验检测0、24、48 h的细胞迁移;RNA测序从转录组水平揭示TRIM21参与调控的下游分子,并进行功能分析.结果 结肠癌患者癌组织中TRIM21免疫组化评分[(2.700±0.250)分]明显高于癌旁组织[(2.500±0.346)分],差异有统计学意义(P<0.05).HCT116、HT29、SW620细胞TRIM21蛋白相对表达量(1.443±0.108、2.413±0.526、1.453±0.154)较NCM460细胞(1.000±0.000)明显升高(P<0.01).SRB细胞增殖实验结果显示,在48 h、72 h和96 h,过表达组的HCT116结肠癌细胞生长能力(0.382±0.013,1.083±0.176,1.432±0.051)较对照组(0.292±0.039,0.856±0.065,1.186±0.101)明显增强(P<0.05).48、72、96 h,低表达组HCT116结肠癌细胞生长能力(0.321±0.008,0.725±0.039,1.035±0.071)较空载组(0.392±0.026,0.857±0.055,1.275±0.027)明显降低(P<0.05).24、48 h,过表达组结肠癌细胞的迁移能力[(43.756±3.987)％、(58.009±7.370)％]较对照组[(27.926±4.312)％、(43.075±2.888)％]明显增强(P<0.01),低表达组细胞的迁移能力[(19.376±5.107)％、(31.506±5.085)％]较空载组[(29.648±4.838)％、(42.731±3.715)％]明显减弱(P<0.01).结论 干扰TRIM21基因表达可抑制结肠癌HCT116细胞的增殖和迁移,为结肠癌靶向治疗提供了一个新的方向.