褪黑素对顺铂诱导的小鼠睾丸支持细胞TM4损伤保护作用机制

• 作者: 丁涛 姜经航 曹玉平 杜家成 江梅 洪乐鹏 王婷婷 王开秀 王洋 蔡丽丽 邵帅
• 来源期刊: 医学研究生学报
• 学科: 医学
• 关键词: 褪黑素 氧化应激 睾丸支持细胞 顺铂
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1140-1144
• 页数: 5页
• 分类号: R979.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16571/j.cnki.1008-8199.2020.11.004

摘要

目的 顺铂应用于睾丸支持细胞方面的研究较少.文中旨在探索褪黑素对顺铂诱导的小鼠睾丸支持细胞TM4氧化损伤的保护作用研究,并探讨其可能的机制.方法 体外培养小鼠睾丸支持细胞TM4,将细胞分为对照组(给予等量等渗盐水)、顺铂组(添加0.014 mg/mol的顺铂孵育24 h造就损伤模型)、顺铂+褪黑素组(顺铂处理前0.5 h添加1 mmol/L的褪黑素预处理)、褪黑素组(添加1 mmol/L的褪黑素孵育).采用MTT法检测褪黑素和顺铂对TM4细胞生长的影响以及检测褪黑素对顺铂诱导的TM4细胞氧化损伤的保护作用;检测细胞内丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)、还原性谷胱甘肽(GSH)以及过氧化氢酶(CAT)的含量;Western blot检测细胞内ZO-1、Occludin、β-catenin、及Nrf2/ARE通路核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)和醌氧化还原酶(NQO1)等蛋白表达情况.结果 活力检测结果显示,顺铂组丙二醛活力表达较对照组明显升高(P<0.05),较顺铂+褪黑素组明显降低(P<0.05),SOD、GSH、CAT活力表达较对照组、顺铂+褪黑素组明显下降(P<0.01).褪黑素组SOD、CAT表达较对照组明显升高(P<0.05).顺铂+褪黑素组、对照组ZO-1、Occludin蛋白表达较顺铂组明显升高(P<0.01),β-catenin蛋白较顺铂组明显降低(P<0.01);顺铂+褪黑素组ZO-1、Occludin蛋白表达较褪黑素组明显降低(P<0.01).Western blot结果显示,顺铂组中Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达(0.31±0.03、0.27±0.02、0.42±0.03)较对照组(1.00±0.13、1.00±0.14、1.00±0.17)明显下降(P<0.01);顺铂+褪黑素组Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达(0.90±0.05、0.82±0.04、0.77±0.05)较顺铂组明显升高(P<0.01),HO-1、NQO1表达较褪黑素组明显降低(P<0.01).结论 褪黑素能有效抑制顺铂诱导的TM4细胞毒性损伤作用,其机制可能与激活NF-E2相关因子2/抗氧化反应元件信号通路相关.