摘要:
目的 研究氧化石墨烯纳米粒子对SH-SY5Y细胞增殖和凋亡的影响.方法 将氧化石墨烯粉末溶于纯水,超声至粒径小于300 nm.以SH-SY5Y细胞为研究对象,用CCK8法检测0,40,80,120,160,200,240,280,320,360μg/ml氧化石墨烯纳米粒干预SH-SY5Y细胞24,48 h对细胞相对增殖率的影响,不加氧化石墨烯(0μg/ml)设为正常对照组.通过光学显微镜观察与氧化石墨烯共孵育24,48 h后各组细胞形态变化.Western blot和RT-PCR法检测氧化石墨烯纳米粒处理24,28 h细胞凋亡蛋白Bcl-2,Bax及基因caspase-3、Bcl-2和Bax表达.结果 纳米氧化石墨烯呈薄片状分布,稳定性好.CCK-8法结果表明小于80μg/ml的氧化石墨烯可促进SH-SY5Y细胞活力,差异有统计学意义(P<0.01),随着浓度增加,细胞活力降低,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).显微镜下观察到200μg/ml的纳米氧化石墨烯处理后的细胞具有明显的细胞凋亡特征的形态学变化.24 h和48 h的Western blot结果显示,随着氧化石墨烯浓度增加,Bcl-2和Bax蛋白表达量的比值也随之下降,且均在120μg/ml时与正常组表达差异有统计学意义(P<0.01).RT-PCR结果表明,浓度大于120μg/ml的氧化石墨烯处理细胞24 h和48 h后与同时间的正常组比较,caspase-3基因上调,Bcl-2与Bax基因表达量比值下降,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 氧化石墨烯纳米粒抑制SH-SY5Y神经细胞增殖,其机制可能与调控线粒体凋亡因子caspase-3和蛋白Bax、Bcl-2有关.