从江香猪OB基因序列及对皮下脂肪前体细胞的调控研究

• 作者: 倪萌萌 吴巧群 崔小芝 朱晓锋 李雄 杨云 田念念 许厚强 谢玲玲
• 来源期刊: 中国畜牧杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 肥胖基因 瘦素蛋白 脂肪酸合成酶 皮下脂肪前体细胞 表达载体 原代细胞
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 遗传育种
• 页码范围: 96-103
• 页数: 8页
• 分类号: S828.2
• 字数: 6780字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19556/j.0258-7033.20191126-03

摘要

本文旨在探究从江香猪肥胖基因(OB sese,OB)的结构、性质以及在脂肪沉积过程中的表达调控,为进一步以从江香猪为肥胖症动物研究模型提供基础数据.研究通过提取纯种从江香猪、苏香杂交猪和大白猪心脏、肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、大肠、小肠、脂肪、背最长肌9个组织的总RNA,逆转录后经qRT-PCR检测不同猪种不同组织中mRNA的表达水平,扩增从江香猪OB基因全长CDS序列;测序后进行生物信息学分析,构建pEGFP-C1-OB表达载体并瞬时转染至培养的从江香猪皮下脂肪前体细胞中,检测各脂质代谢相关基因的表达规律.结果表明:OB基因在从江香猪各组织器官中均有表达,其在脂肪组织中的表达水平极显著高于其他组织;与GenBank登记的野猪(Sus Scrofa)序列相比较,存在241 bp处(T→C)和462处(G→T)2个同义突变位点;氨基酸第1位至22位为蛋白信号肽区域,同时存在一个螺旋跨膜结构,概率为84.63％.表达载体转染细胞后,OB基因上调导致神经肽Y(Neuropeptide Y,NPY)、乙酰辅酶A羧化酶A(Acetyl-CoA carboxylase A,ACACA)、3-磷酸甘油酰基转移酶(Glycerol-3-phosphate acyltransferase,GPAM)的表达水平极显著提高,而二酰基甘油酰基转移酶1基因、脂蛋白脂酶、过氧化物酶体增殖激活受体γ、脂肪酸合成酶的表达水平极显著降低.