miR-486-5p靶向FOXO1抑制结肠癌干细胞干性的初步研究

• 作者: 王梦萍 艾成思 龚立刚
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 结肠癌 CSCs miR-486-5p FOXO1 干性
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 528-533
• 页数: 6页
• 分类号: R735.3
• 字数: 4322字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.04.009

摘要

目的 研究miR-486-5p在结肠癌(CRC)细胞系和CRC干细胞(CSCs)中的表达水平,并探讨miR-486-5p对CRC CSCs干性的影响和对FOXO1的靶向调控作用.方法 qRT-PCR检测miR-486-5p在CRC细胞系SW480、HCT116、SW620和HT29及正常结肠细胞系NCM460中的表达水平.培养HCT116细胞中的CSCs.Western blot检测Nanog、SOX2、OCT4干性标志蛋白及miR-486-5p在CSCs中的表达.经脂质体分别转染miR-486-5p mimic和对照(NC)48 h后,MTS检测CSCs增殖能力,Transwell实验检测CSCs转移能力,Boyden实验检测CSCs侵袭能力.遗传霉素(G418)筛选稳定过表达miR-486-5p的CSCs细胞,注射到BALB/c裸鼠皮下,观察miR-486-5p对CSCs体内致瘤能力的影响.经Targetscan 7.1软件预测及双荧光素酶报道基因实验,验证miR-486-5p对FOXO1基因的靶向作用,qRT-PCR检测miR-486-5p对CSCs中FOXO1 mRNA表达影响.结果 qRT-PCR结果显示miR-486-5p在CRC细胞系中的表达低于正常结肠细胞系(均P＜O.05).OCT4、Nanog、SOX2干细胞标志物在CSCs中表达上调;miR-486-5p在CSCs中表达显著下降;miR.486-5p mimic后,CSCs细胞增殖、转移及侵袭能力均下降(均P＜0.05).CSCsmiR-486-5p裸鼠成瘤能力降低(P＜0.05).TargetScan7.1预测软件和双荧光素酶报道基因实验证实FOXO1为miR-486-5p的靶基因,miR-486-5p mimic组FOXO1 mRNA的表达减少(P＜0.05).结论 miR-486-5p在CRC细胞系和CSCs中均低表达,miR-486-5p能通过负调控FOXO1抑制CSCs的干性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龚立刚	武汉市第八医院病理科	7	15	3.0	3.0
2	艾成思	武汉市第八医院检验科	1	0	0.0	0.0
3	王梦萍	武汉市第八医院病理科	1	0	0.0	0.0