猪流行性腹泻病毒在稳定表达猪ACE2基因的IPEC-J2细胞中的增殖研究

• 作者: 刘志成 康桦华 张建峰 张春红 沈海燕
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪小肠上皮细胞 血管紧张素转换酶2 猪流行性腹泻病毒 增殖
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 38-43
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 5600字
• 语种: 中文

摘要

为获得稳定表达猪源血管紧张素转换酶2(ACE2)的细胞株,用以增殖猪流行性腹泻病毒(PEDV).构建了稳定表达猪源ACE2的猪小肠上皮细胞系(IPEC-J2),并对PEDV在该细胞上的增殖进行了分析.将重组表达质粒pCMV3-porcine-ACE2-GFP转染至IPEC-J2细胞后,经潮霉素B筛选和单克隆细胞培养,获得IPEC-J2-ACE2细胞系.通过荧光定量RT-PCR和Western blot对单克隆细胞中ACE2基因的mRNA转录和蛋白表达水平进行鉴定.以PEDV-WH株感染IPEC-J2-ACE2细胞,通过间接免疫荧光试验和荧光定量RT-PCR检测发现,PEDV-WH株在IPEC-J2-ACE2细胞中比在IPEC-J2细胞中的增殖能力高.