重组鸭γ-干扰素的表达与抗病毒活性分析

• 作者: 崔平福 张紫菡 朱善元 王永娟 郭艳丽 陆辉 陈梓岳
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: γ-干扰素 类弹性蛋白多肽 纯化 抗病毒活性
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 免疫学
• 页码范围: 816-821
• 页数: 6页
• 分类号: S852.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.201912021

摘要

为表达重组鸭γ-干扰素(DuIFNγ),并鉴定其在体内、体外抗病毒活性,本研究根据大肠杆菌密码子的偏好性对GenBank中登录的DuIFNγ序列进行优化并合成,将其克隆至pET30a-ELP表达载体中进行重组蛋白诱导表达,并利用类弹性蛋白多肽(ELP)的可逆相变循环特性进行纯化,结果显示,重组蛋白(rELP-DuIFNγ)正确表达,纯化后的rELP-DuIFNγ纯度达90％以上.通过细胞病变抑制法,在VSV/MDCK系统和VSV/DEF系统中检测rELP-DuIFNγ体外抗病毒活性,结果显示,rELP-DuIFNγ在VSV/MDCK系统和VSV/DEF系统中的抗病毒活性分别为为4.17×104 U/rmg和4.54× 105 U/mg.利用雏鸭感染DHAV-1,同时灌服rELP-DuIFNγ,观察并计算雏鸭发病时间与存活率,初步研究rELP-DuIFNγ的体内抗病毒作用,结果显示rELP-DuIFNγ在体内可以延缓雏鸭发病时间、降低其发病率.以上结果表明,rELP-DuIFNγ在大肠杆菌中可高效表达,在体内外均具有一定的抗病毒活性.本研究为基因工程DuIFNγ制剂的研制及临床应用奠定了基础.