犬干扰素α2的原核表达及抗病毒活性分析

• 作者: 吴世妍 夏兴霞 姚凌云 欧阳伟 潘群兴 王晓丽 王晶宇 王永山 芮荣 诸玉梅 钱晶
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 重组犬干扰素α2 原核表达系统 抗病毒活性
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 其他
• 页码范围: 59-63
• 页数: 5页
• 分类号: S852.42
• 字数: 4396字
• 语种: 中文

摘要

本研究将人工合成的犬干扰素α2成熟区序列插入原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-28a-CaIFN-α2;然后将该质粒转化至大肠杆菌Rosetta感受态中进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot分析鉴定,分子量约为23 kDa的目的蛋白表达,表达的重组蛋白主要以包涵体的形式存在,表达量约占菌体总蛋白的52.5%.包涵体蛋白经变性、复性和纯化处理后,获得的重组CaIFN-α2纯度为92%;用MDCK/VSV微量细胞病变抑制法检测重组蛋白的抗病毒活性为3.16×106/mL.本研究结果为进一步研制新型犬用干扰素制品奠定了物质基础.