鹅γ-干扰素的原核表达及抗病毒活性研究

• 作者: 付薇 刘棋 徐贤坤 熊毅 胡晓静
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 鹅 γ-干扰素 原核表达 抗病毒活性
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 65-70
• 分类号: S858.33|Q78
• 字数: 4779字
• 语种: 中文

摘要

本研究采用RT-PCR方法从培养的鹅外周血淋巴细胞总RNA中成功扩增到鹅IFN-γ基因.将克隆在pMD18-T载体中的鹅IFN-γ基因插入原核表达载体pGEX-6P-1,得到重组质粒pGEX-6P-1 -IFN-γ.重组质粒转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导后作SDS-PAGE分析,得到约43 ku融合表达蛋白特异条带.用GST亲和纯化柱对原核表达产物中目的蛋白进行纯化,得到1.2 mg/L的纯化蛋白.用100TCID50病毒量在鹅副黏病毒( GPMV)/鹅胚成纤维细胞系统上测定表达蛋白的抗病毒活性,观察不同处理组的细胞形态并用RT-PCR方法鉴定,发现表达蛋白稀释倍数小于104可抑制GPMV复制,按照Reed-Muench法计算表达的鹅IFN-γ抗病毒效价为2.0×103 U/mL,表明表达蛋白具有良好的抗病毒活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘棋		5	10	2.0	3.0
2	付薇		7	25	3.0	4.0
3	熊毅		11	41	4.0	6.0
4	胡晓静		2	1	1.0	1.0
5	徐贤坤		3	2	1.0	1.0