林麝源化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌和肺炎链球菌三重实时荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 刘二龙 周建文 唐婕 杨超 王艳 索丽娟 蒋本模 边坤
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 林麝 化脓隐秘杆菌 溶血性曼氏杆菌 肺炎链球菌 三重实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2020,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 23-27
• 页数: 5页
• 分类号: S852.61|S863.9
• 语种: 中文

摘要

为快速准确检测化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌和肺炎链球菌,分别根据化脓隐秘杆菌plo基因、溶血性曼氏杆菌ICEMh1基因和肺炎链球菌pspC基因的特异性序列设计引物和探针,以重组质粒a.p-m.h1-s.p为标准品,通过优化反应条件,建立一种检测化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌和肺炎链球菌三重实时荧光定量PCR方法,对其特异性、灵敏度和可重复性进行测试.结果表明,建立的方法对标准品阳性质粒的最低检测量为20拷贝,标准曲线在1.25×106 copies/μL～1.0×101 copies/μL范围内具有良好的线性关系.对2016年-2018年在陕西省收集的病料中化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌和肺炎链球菌检出率分别为66.67％、5.5％和44.44％.建立的三重实时荧光定量PCR方法能快速、准确和稳定地检测化脓隐秘杆菌、溶血性曼氏杆菌和肺炎链球菌.