猪急性腹泻综合征病毒RT-PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 司广斌 梁文清 贺东生 陈一波 陈志飞
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 猪急性腹泻综合征病毒 N基因 RT-PCR 诊断
• 年，卷（期）: 2020,（11）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 76-81
• 页数: 6页
• 分类号: S855.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2020.11.015

摘要

为建立一种鉴定猪急性腹泻综合征病毒(SADS-CoV)的RT-PCR方法,根据NCBI登录的SADS-CoV N基因保守区域序列,设计了3对引物(P1、P2和P3),通过对SADS-CoV及其他6种病毒进行检测,筛选出最合适的引物,然后对退火温度、引物浓度、dNTPs浓度、rTaq DNA聚合酶浓度和循环次数等反应条件进行了优化.结果显示,P3引物对SADS-CoV特异性最好,与其他病毒无交叉反应.敏感性试验显示,该方法最低检测限可达9.55×102 copies/μL;重复性试验显示该方法重复性良好.运用建立的RT-PCR方法,对广东省的21份临床样品进行检测,结果检出SADS-CoV阳性样品4份,阳性样品的测序结果与其RT-PCR完全一致.结果表明,本研究成功建立了一种鉴定SADS-CoV的RT-PCR方法,且该方法具有检测快速、成本廉价、特异性强、敏感性高和重复性好的优点,可以用于SADS-CoV的临床诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贺东生		107	523	11.0	18.0
2	司广斌		3	0	0.0	0.0
3	陈志飞		2	0	0.0	0.0
4	梁文清		2	0	0.0	0.0
5	陈一波		1	0	0.0	0.0