SIRT1对H2O2诱导的人卵巢颗粒细胞氧化应激损伤的影响

• 作者: 和斌 李祺越 洪岭 伍园园 滕晓明 唐传玲
• 来源期刊: 上海交通大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 卵巢颗粒细胞 沉默信息调节因子1 氧化应激损伤 衔接蛋白P66SHC B淋巴细胞瘤-2因子
• 年，卷（期）: 2020,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1591-1597
• 页数: 7页
• 分类号: R711.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2020.12.004

摘要

目的·探讨沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)在H2O2诱导的人卵巢颗粒细胞氧化应激损伤中的作用及可能机制.方法·分别用0、100、250、500、1000μmol/L H2O2处理人卵巢颗粒细胞SVOG 4、8、12、24 h,CCK-8法检测细胞活力,选择合适的H2O2浓度和处理时间用于建立颗粒细胞体外氧化应激损伤模型.荧光显微镜观察H2O2处理后细胞核形态变化,试剂盒检测细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;实时定量PCR、Western blotting分析分别检测SIRT1、衔接蛋白P66SHC(the 66 kDa Src homology 2 domain containing isoform)及B淋巴细胞瘤-2因子(B-cell lymphoma-2,BCL-2)mRNA和蛋白的表达水平;脂质体转染SIRT1过表达质粒后,SVOG细胞再经H2O2处理,同样观察上述指标的变化.结果 ·250μmol/L H2O2处理SVOG细胞12 h,可诱发细胞活力明显下降(P=0.017),细胞核固缩,MDA含量增加(P=0.001),SOD活性下降(P=0.006);伴随SIRT1、BCL-2 mRNA和蛋白表达降低,P66SHC表达升高.SIRT1过表达后再经H2O2处理,与H2O2处理组相比,SVOG细胞核恢复正常形态,MDA含量下调(P=0.038),SOD活性回升(P=0.021),P66SHC表达降低(P=0.002),BCL-2表达升高(P=0.013).结论·SIRT1可能通过下调P66SHC和上调BCL-2的表达发挥对抗人卵巢颗粒细胞氧化应激损伤的作用.