DDR1对奶牛乳腺上皮细胞增殖与凋亡的调控作用

• 作者: 刘双行 华丽萍 叶挺柱 杨利国 梁爱心 熊家军 赵鑫哲
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 盘状蛋白结构域受体1 奶牛乳腺上皮细胞 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 遗传育种
• 页码范围: 2109-2119
• 页数: 11页
• 分类号: S823.91
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2020.09.008

摘要

旨在通过干扰或过表达盘状蛋白结构域受体1 (DDR1)基因,探讨其对奶牛乳腺上皮细胞增殖、凋亡及周期的影响.本研究将DDR1基因小干扰RNA片段和过表达载体pcDNA3.1-DDR1转染奶牛乳腺上皮细胞,采用qRT-PCR和Western blot检测细胞中DDR1的干扰和过表达效果;利用CCK-8法检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡(早凋、晚凋)的变化;利用qRT-PCR检测增殖与凋亡相关基因的表达情况.结果 ,在奶牛乳腺上皮细胞中干扰DDR1基因后,其mRNA和蛋白表达分别下调94％和30％,而过表达DDR1基因后,其mRNA和蛋白表达分别上调68.24和1.38倍;干扰DDR1极显著抑制细胞的增殖(P＜0.01),细胞早凋与晚凋比例极显著上升(P＜0.01);干扰组G1期细胞比例极显著上升(P＜0.01),S期细胞比例极显著下降(P＜0.01),G2期细胞比例显著下降(P＜0.05),提示细胞阻滞在G0/G1期.相反,过表达DDR1能显著促进细胞增殖(P＜0.05),显著抑制细胞晚期凋亡(P＜0.05),G1期细胞比例极显著下降(P＜0.01),S期细胞比例极显著上升(P＜0.01),促进细胞由G1期向S期的转换.qRT-PCR检测结果显示,干扰DDR1后显著上调BAX、Caspase9基因的表达(P＜0.05),极显著上调P53、FAS基因的表达(P＜0.01),且显著下调PCNA、CyclinB1基因的表达(P＜0.05);过表达DDR1后,分别显著和极显著下调Cytc与BAX基因的表达(P＜0.05,P＜0.01),并极显著上调CyclinB1基因的表达(P＜0.01).综上可见,DDR1能够调控奶牛乳腺上皮细胞的增殖、凋亡和周期,可为阐明DDR1参与奶牛乳腺上皮细胞生长发育的分子机制提供参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊家军		33	102	6.0	8.0
2	杨利国		212	1759	21.0	29.0
3	梁爱心		20	57	5.0	6.0
4	华丽萍		5	3	1.0	1.0
5	刘双行		4	2	1.0	1.0
6	赵鑫哲		1	0	0.0	0.0
7	叶挺柱		1	0	0.0	0.0