乙型肝炎病毒X蛋白抑制肝癌细胞系中DKK2的表达

• 作者: 权会琴 杜虹 王伟 王晓艳
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 肝癌 乙型肝炎病毒X蛋白 DKK2 Wnt/β-catenin 甲基化转移酶
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1348-1352
• 页数: 5页
• 分类号: R373
• 语种: 中文

摘要

目的 分析不同肝癌细胞系中乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对DKK2表达水平的影响及其可能机制.方法 应用编码乙型肝炎病毒X蛋白的腺病毒(Ad-HBx)感染HepG2和SMMC7721细胞,利用免疫荧光技术和PCR技术检测X基因的表达、Western blot检测DKK2的蛋白表达水平;应用甲基化转移酶抑制剂(DAC)处理细胞,利用Western blot检测DKK2、Dnmt1、Dnmt3a和Dnmt3b的表达;通过沉默甲基化转移酶,利用Western blot检测DKK2的表达.结果 Ad-HBx感染HepG2和SMMC7721细胞后,HBx mRNA相对表达倍数分别上调61.12倍和50.24倍(P<0.05),DKK2的蛋白表达水平分别下调1.61倍(P<0.05)和3.33倍(P<0.05),Dnmt1和Dnmt3a蛋白表达水平显著升高;相较于Ad-HBx感染组,DAC处理后DKK2蛋白表达水平上调2.27倍(P<0.05),Dnmt3a蛋白水平显著下调,Dnmt1和Dnmt3b蛋白水平无显著变化;沉默Dnmt1和Dnmt3a后,DKK2蛋白表达水平显著上调.结论 HBx通过上调Dnmt1及Dnmt3a发挥甲基化作用来抑制DKK2的表达,进而激活Wnt/β-catenin信号通路,参与HBV相关肝癌的发生.