溶酶体功能变化对3T3L1脂肪前体细胞外泌体调控作用研究

• 作者: 侯智为 刘晶 宋海旭 李佳荫 李玉莹 梅竹 闫承慧
• 来源期刊: 临床军医杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脂肪前体细胞 外泌体 溶酶体
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 540-543
• 页数: 4页
• 分类号: R329
• 字数: 2565字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16680/j.1671-3826.2020.05.17

摘要

目的 探讨体外培养的3T3L1脂肪前体细胞溶酶体损伤对其外泌体分泌的影响.方法 将在DMEM培养基中培养24 h的3T3L1细胞设为对照组;采用Lamp2 shRNA沉默3T3L1细胞中的Lamp2基因表达(Lamp2敲除组),并同时给与NH4 Cl(NH4 Cl组)刺激破坏溶酶体功能.Western blotting、免疫荧光染色检测沉默效应;Lysotracker染色检测溶酶体功能;外泌体定量检测试剂盒进行外泌体定量计数分析;Western blotting检测细胞外泌体相关蛋白表达.结果 NH4Cl组细胞酸性溶酶体数量少于对照组(P<0.05).与对照组比较,NH4Cl组细胞培养基中外泌体数量无明显变化,细胞中外泌体发生相关蛋白Annexin A2、CD63、CD81的转录水平和翻译水平均无明显改变(P>0.05).Lamp2敲除组细胞酸性溶酶体数量及Lamp2蛋白水平、荧光数量和强度均明显低于对照组(P<0.05).与对照组比较,Lamp2敲除组细胞培养基中外泌体数量无明显变化,细胞中外泌体发生相关蛋白Annexin A2、CD63、CD81的转录水平和翻译水平均无明显改变(P>0.05).结论 体外培养的3 T3 L1脂肪前体细胞溶酶体损伤不能影响细胞外泌体的分泌.