miR-497-5p靶向WWP1调控人瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖和凋亡

• 作者: 杨喜明 池凯 高东东 高栋梁
• 来源期刊: 中国实验诊断学
• 学科: 医学
• 关键词: miR-497-5p WWP1 瘢痕疙瘩成纤维细胞 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 983-989
• 页数: 7页
• 分类号: R392
• 字数: 4738字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨微小RNA-497-5p(miR-497-5p)是否通过靶向含有WW结构域的E3泛素蛋白连接酶1(WWP1)调控人瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖和凋亡.方法 实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)测定瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)和正常皮肤成纤维细胞(NFB)中miR-497-5p、WWP1 mRNA和蛋白表达.TargetScan预测miR-497-5p和WWP1的靶向关系,双荧光素酶报告和Western blot进一步验证.构建miR-497-5p过表达或抑制WWP1表达的细胞,Western blot检测WWP1、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡.共转染miR-497-5p和pcDNA-WWP1,观察WWP1过表达对miR-497-5p过表达诱导的KFB细胞增殖和凋亡的影响.结果与NFB相比,KFB内miR-497-5p表达量明显下调(P<0.05),WWP1 mRNA和蛋白表达量显著上调(P<0.05).miR-497-5p靶向调控WWP1的表达.miR-497-5p过表达明显降低KFB 48h、72h的细胞活性、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达,提高细胞凋亡率、p21、Bax蛋白水平(P<0.05),与抑制WWP1表达结果相同.WWP1过表达逆转了miR-497-5p过表达对KFB增殖、WWP1、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达的抑制作用,以及对细胞凋亡、p21、Bax蛋白表达的促进作用.结论 过表达 miR-497-5p 通过靶向调控 WWP1 抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖,并诱导其凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨喜明	延安大学附属医院烧伤整形手外科	33	92	6.0	8.0
2	高东东	延安大学附属医院烧伤整形手外科	12	21	3.0	4.0
3	高栋梁	延安大学附属医院烧伤整形手外科	20	61	5.0	7.0
4	池凯	郑州郑东诺亚一家医疗美容门诊部整形外科	1	0	0.0	0.0