HAGLROS靶向miR-20a-5p调控高糖诱导的心肌细胞增殖和凋亡

• 作者: 刘晓东 刘晓琴 党宏伟 赵玲
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: HAGLROS miR-20a-5p 高糖 心肌细胞 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2020,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2159-2165
• 页数: 7页
• 分类号: R542.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.16190/j.cnki.45-1211/r.2020.12.011

摘要

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)HAGLROS对高糖(HG)诱导的心肌细胞H9c2增殖和凋亡的影响及作用机制.方法:H9c2细胞分为对照组(NC组,细胞正常培养)、HG组(33mmol/L葡萄糖作用细胞24h)、HG+si-NC组(33mmol/L葡萄糖作用转染si-NC的细胞24 h)、HG+si-HAGLROS组(33 mmol/L葡萄糖作用转染si-HAGLROS的细胞24 h)、HG+miR-NC组(33mmol/L葡萄糖作用转染miR-NC的细胞24h)、HG+miR-20a-5p组(33mmol/L葡萄糖作用转染miR-20a-5p mimics的细胞24 h)、HG+si-HAGLROS+anti-miR-NC组(33 mmol/L葡萄糖作用于共转染si-HAGLROS与anti-miR-NC 的细胞24 h)和HG+si-HAGLROS+anti-miR-20a-5p组(33 mmol/L葡萄糖作用于共转染si-HAGLROS与anti-miR-20a-5p的细胞24 h),实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞中HAGLROS和miR-20a-5p表达,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)、流式细胞术和蛋白印迹(Western blot-ting)分别检测细胞存活率、凋亡率及细胞周期蛋白Dl(CyclinDl)、活化的半胱天冬酶-3(cleaved-caspase-3)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的蛋白表达的影响.双荧光素酶报告基因实验验证HAGLROS与miR-20a-5p调控关系.结果:与NC组比较,HG组HAGLROS水平升高(P<0.05),miR-20a-5p水平降低(P<0.05),H9c2细胞存活率和CyclinDl蛋白水平降低(P<0.05),而细胞凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白水平升高(P<0.05).与HG+si-NC组比较,HG+si-HAGLROS组H9c2细胞存活率和CyclinD1、p-PI3K和p-AKT蛋白水平升高(P<0.05),而细胞凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白水平降低(P<0.05).与HG+miR-NC组,HG+miR-20a-5p组H9c2细胞存活率和CyclinD1蛋白表达升高(P<0.05),而细胞凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白表达降低(P<0.05).与HG+si-HAGLROS+anti-miR-NC组比较,HG+si-HAGLROS+anti-miR-20a-5p组H9c2细胞存活率和CyclinD1、p-PI3K和p-AKT蛋白表达降低(P<0.05),而细胞凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白表达升高(P<0.05).HAGLROS在H9c2细胞中靶向负调控miR-20a-5p表达.结论:低表达HAGLROS可促进HG诱导的心肌细胞增殖且抑制细胞凋亡,其作用机制与上调miR-20a-5p表达和激活PI3K/AKT信号通路有关.