金黄色葡萄球菌FnbpA免疫优势片段的构建及免疫保护性研究

• 作者: 刘道龙 杨光 杨汐静 杨阳 陈晓婷
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 金黄色葡萄球菌 FnbpA 重组蛋白 免疫保护作用
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 生物信息学
• 页码范围: 813-818
• 页数: 6页
• 分类号: R392
• 字数: 5939字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2020.05.028

摘要

目的 构建金黄色葡萄球菌FnbpA蛋白免疫优势片段原核表达菌株并研究其重组蛋白免疫原性.方法 根据预测确定N区优势片段,通过聚合酶链反应(PCR)法对目的片段进行基因扩增,转入表达栽体pET-32a,并导入宿主菌大肠杆菌(E.coli)Rosstta中进行原核表达;将N区优势片段与重复区优势片段通过重叠延伸聚合酶链反应(overlap PCR)融合,原核表达;将蛋白FL纯化,分别免疫Balb/c小鼠,并检测小鼠IgG水平、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、免疫保护率.结果 各重组蛋白在E.coli Rosstta中均获得表达,表达后FnbpA301-430aa、FL蛋白大小分别约39.3 × 103,49.1×103;抗体水平检测结果表明重组蛋白FL抗体水平接近全蛋白FnbpA,高于FnbpA301-430aa;重组FL组淋巴细胞分泌IL-4、IFN-γ、IL-17的能力与FnbpA301-430aa比较差异有统计学意义(P＜0.05);攻毒结果表明,全蛋白FnbpA实验组免疫保护性最好,FL实验组保护性效果优于FnbpA301-430aa.结论 成功构建了金黄色葡萄球菌FnbpA免疫优势截短体蛋白的原核表达菌株,重组蛋白FL具有良好的免疫保护性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨阳	四川大学华西医院动物实验中心	90	201	7.0	12.0
2	杨光	四川大学华西医院动物实验中心	35	106	5.0	8.0
3	杨汐静	四川大学华西医院动物实验中心	2	1	1.0	1.0
4	陈晓婷	四川大学华西医院动物实验中心	4	57	2.0	4.0
5	刘道龙	黑龙江八一农垦大学生命学院	2	0	0.0	0.0