丹酚酸B对高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响及其机制研究

• 作者: 孙兰 张帆 田平平 肖瑛 郭兵
• 来源期刊: 中国中药杂志
• 关键词: 丹参 丹酚酸B PPARγ PTEN 上皮-间充质转分化
• 年，卷（期）: 2020,（16）
• 所属期刊栏目: 药理
• 页码范围: 3922-3930
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.19540/j.cnki.cjcmm.20200405.403

摘要

观察丹参的主要成分丹酚酸B (salvianolic acid B,Sal B)对高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞向间充质细胞转分化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响,探讨其防治糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的可能机制.采用体外培养大鼠近端肾小管上皮NRK-52E细胞,随机分为对照组(NG)、高糖组(HG)、高糖+10 μmol·L-1Sal B组(Sal B),上述3组分别设6,12,24,48h4个时间点进行动态观察;高糖+Sal B不同浓度(1,5,10 μmol· L-1)组、高糖+5.0 μmol·L-1吡格列酮对照组(pioglitazone,PIO)、高糖+10 μmol· L-1 Sal B+5.0 μmol· L-1 GW9662对照组(Sal B+GW9662).采用Western blot法检测PPARy,PTEN,α-SMA,E-cadherin的表达变化以及PI3K/Akt通路的变化;Real-time PCR法检测PPARγ,PTEN mRNA的表达水平.结果 显示,与NG组相比,HG组PPARγ,PTEN mRNA和蛋白表达水平均逐渐降低,α-SMA,p-Akt(Thr308)蛋白表达水平逐渐增高,E-cadherin蛋白表达水平逐渐降低,呈时间依赖性;与HG组相比,高糖+Sal B不同浓度组随Sal B剂量增加,PPARγ,PTEN mRNA和蛋白表达水平逐渐增高,α-SMA,p-Akt(Thr308)蛋白表达水平逐渐降低,E-cadherin蛋白表达水平逐渐增高,呈剂量依赖性(P＜0.05),但1 μmol· L-1浓度的Sal B对PPARγ mRNA和蛋白、PTEN mRNA表达的影响没有显著性差异;与HG组相比,Sal B动态观察组PPARγ mRNA(除6h)和蛋白(除6h),PTEN mRNA(除6h)和蛋白(除6,12 h)表达水平明显增高,α-SMA,p-Akt(Thr308)(除6h)蛋白表达水平明显降低,E-cadherin蛋白表达水平明显增高(P＜0.05);与HG组相比,Sal B和PIO显著增强PPARγ,PTEN mRNA和蛋白表达水平,增高E-cadherin蛋白表达水平,降低α-SMA,p-Ak(Thr308)蛋白表达水平(P＜0.05),各用药组之间差异无统计学意义;而Sal B+GW9662对照组PPARγ和PTEN的mRNA和蛋白,E-cadherin、α-SMA和p-Akt(Thr308)蛋白表达水平与高糖组比较没有统计学意义,Sal B的作用效应被PPARγ拮抗剂GW9662阻断.结果 表明,丹酚酸B可抑制高糖诱导的NRK-52E细胞发生EMT,其机制可能为Sal B通过激活PPARγ的活性,上调PTEN表达,进而抑制PI3K/Akt信号通路的致纤维化效应有关.