小鼠单核细胞破骨向分化与乳酸浓度的关系

• 作者: 廖红兵 曲任飞 李冬冬 胡焕英 陈国志 陈晓薇 麦昱颖
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 乳酸 单核细胞 破骨细胞 分化 活化T细胞核因子c1 细胞增殖 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2020,（14）
• 所属期刊栏目: 口腔组织构建
• 页码范围: 2177-2183
• 页数: 7页
• 分类号: R318.08|R459.9|R68
• 字数: 7630字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2229

摘要

背景:前期研究发现聚乳酸复合材料可以加快骨改建速率,其作用机制有待进一步研究.目的:观察不同乳酸浓度对小鼠单核细胞破骨向分化的影响.方法:分别用含0,5,10,20 mmol/L乳酸的DMEM完全培养基,在50 μJg/L RANKL的诱导下培养小鼠RAW264.7细胞5d,0 mmol/L乳酸组即为对照组.CCK-8法分析乳酸浓度对细胞增殖率的影响;使用抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒对抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核细胞进行染色和计数;RT-PCR检测酸性磷酸酶5、活化T细胞核因子c1、RANK的基因表达;Western Blot检测组织蛋白酶K、活化T细胞核因子c1的蛋白表达.结果 与结论:①5 mmol/L乳酸浓度条件下,小鼠RAW264.7细胞的增殖率最高,20 mmol/L乳酸浓度条件下的细胞增殖率最低;与对照组相比,10 mmol/L乳酸浓度对小鼠RAW264.7细胞增殖率无显著性意义;②在10 mmol/L乳酸浓度条件下,抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性率最高,酸性磷酸酶5、活化T细胞核因子c1、RANK的mRNA表达量最高;③随着乳酸浓度的升高,组织蛋白酶K蛋白表达水平呈递增趋势,而活化T细胞核因子c1的蛋白表达水平呈递减趋势;④提示在目前实验条件下,随着乳酸浓度的升高,乳酸促小鼠RAW264.7细胞破骨向分化的能力先升高后降低,10 mmol/L乳酸为促小鼠RAW264.7细胞破骨向分化的最适浓度.乳酸可以绕过核因子κB信号通路中活化T细胞核因子c1位点影响小鼠RAW264.7细胞破骨向分化.