家蝇抗真菌肽-1A对人肝癌细胞HepG2抑制作用的机制

• 作者: 吴坤 马晓琳 张迎春 邓思波 黄敏慧 吴建伟 陈峥宏 王涛
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞凋亡 细胞周期 膜电位,线粒体 抗菌肽 家蝇抗真菌肽-1A 肝癌细胞 活性氧
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 131-136,142
• 页数: 7页
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.2096-8388.2021.02.002

摘要

目的 探究家蝇抗真菌肽-1A(MAF-1A)对人肝癌细胞HepG2抑制作用的机制.方法 采用原核串联表达及镍柱亲和层析法制备MAF-1A;取人肝癌细胞HepG2进行传代培养,采用透射电镜技术,观察不同浓度MAF-1A(0、50、100mg/L)作用细胞HepG2细胞24h后对细胞超微结构的影响;采用流式细胞术检测MAF-1A(0、100、200及400mg/L)作用HepG2细胞24h后的细胞周期、细胞内ROS水平及细胞凋亡率;以荧光探针法检测MAF-1A(0、100、200及400mg/L)作用HepG2细胞24h后的线粒体膜电位.结果 透射电镜结果显示,MAF-1A作用后HepG2细胞出现染色质边集,核固缩,胞膜出芽、空泡化、形成凋亡小体等形态学变化;流式细胞术检测结果显示,与0mg/L MAF-1A组比较,MAF-1A各浓度组均可使G0/G1期的细胞比例升高(P<0.01),细胞凋亡率明显增高(P<0.01),当MAF-1A浓度达400mg/L时、细胞内活性氧(ROS)含量明显增多(P<0.01);荧光探针检测发现,与0mg/L MAF-1A组比较,MAF-1A可使HepG2细胞的线粒体膜电位显著下降,并且随着MAF-1A浓度的升高,线粒体膜电位下降细胞数的占比增高.结论 MAF-1A可能通过促进线粒体膜电位下调、增加细胞内ROS含量所介导的细胞凋亡,以及阻滞细胞周期来发挥抑制HepG2细胞的作用.