微小RNA-9-5p调控脂多糖诱导小鼠树突状细胞免疫功能的机制研究

• 作者: 常永丽 张丽英 段晓星 米建强
• 来源期刊: 安徽医药
• 关键词: 微RNAs 衔接蛋白质类,信号转导 脂多糖 转录激活因子6 免疫系统 抗原,CD 白细胞介素类 miR-9-5p 免疫功能
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 药学研究
• 页码范围: 17-22
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

目的 研究微小RNA-9-5p(miR-9-5p)对脂多糖炎性损伤小鼠树突状细胞(DCs)免疫功能的影响,并探讨其机制.方法 该研究于2019年1—9月完成.小鼠树突状细胞DC2.4购于美国模式培养物中心.运用脂多糖(LPS)处理DC2.4细胞,建立炎性树突状细胞损伤模型;将miRNA模拟物阴性对照(miR-NC)、miR-9-5p模拟物(mimics)、miRNA抑制物阴性对照(anti-miR-NC)、miR-9-5p抑制剂(anti-miR-9-5p)、小干扰RNA无序对照(si-NC)组、信号转导和转录激活因子6(STAT6)的小干扰RNA(si-STAT6)、miR-9-5p mimics+空载体质粒(pcDNA)、miR-9-5p mimics+STAT6过表达质粒(pcDNA-STAT6)均用脂质体法转染至LPS诱导的DC2.4细胞;噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞中miR-9-5p、STAT6、白细胞分化抗原80(CD80)、白细胞分化抗原86(CD86)、白细胞介素-12(IL-12)的mRNA表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中STAT6的蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测细胞的荧光素酶活性.结果 与正常DC2.4相比,脂多糖炎性损伤的DC2.4细胞中miR-9-5p表达(0.16±0.01)比(1.00±0.08)降低,STAT6表达(3.02±0.26)比(1.00±0.07)升高(P<0.05);过表达miR-9-5p可降低LPS诱导的DC2.4细胞中CD80(0.31±0.03)比(1.00±0.08)、CD86(0.29±0.02)比(1.01±0.06)、IL-12(0.46±0.04)比(1.00±0.05)的表达;敲减STAT6可降低LPS诱导的DC2.4细胞中CD80(0.42±0.04)比(1.00±0.08)、CD86(0.34±0.03)比(0.99±0.07)、IL-12(0.29±0.02)比(1.01±0.08)的表达;miR-9-5p明显的抑制野生型STAT6细胞的荧光活性,并负向调控STAT6的表达水平;重要的是,过表达STAT6可逆转过表达miR-9-5p对LPS诱导的DC2.4细胞中CD80[(1.68±0.13)比(1.00±0.06)]、CD86[(1.79±0.15)比(0.99±0.08)]、IL-12[(1.82±0.18)比(0.98±0.09)]的抑制作用.结论 miR-9-5p抑制LPS诱导的DC2.4细胞的免疫功能,其机制可能与靶向STAT6有关,将可为炎性疾病的治疗提供新靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张丽英	郑州大学第一附属医院/郑州大学第一临床学院	17	37	3.0	6.0
2	段晓星	郑州大学第一附属医院/郑州大学第一临床学院	1	0	0.0	0.0
3	常永丽	郑州大学第一附属医院/郑州大学第一临床学院	1	0	0.0	0.0
4	米建强	郑州大学第一附属医院/郑州大学第一临床学院	1	0	0.0	0.0