LncRNA NEAT1调控miR-195对宫颈癌细胞SiHa放射敏感性的影响

• 作者: 王秋宇 姜平 朱军义 许静 郭哲 孙慧霞
• 来源期刊: 现代泌尿生殖肿瘤杂志
• 关键词: 宫颈癌 NEAT1 miR-195 放射敏感性 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 103-108
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1674-4624.2021.02.008

摘要

目的 研究长链非编码RNA(lncRNA)核富集转录本1(NEAT1)对宫颈癌SiHa细胞放射敏感性的影响和潜在的分子机制.方法 体外培养宫颈癌细胞SiHa和正常宫颈细胞Ect1/E6 E7,使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测细胞中NEAT1和miR-195的表达水平.放射处理(0、2、4、6、8 Gy)的宫颈癌SiHa细胞中,RT-qPCR检测NEAT1和miR-195的表达水平.双荧光素酶报告系统验证SiHa细胞中NEAT1与miR-195的调控关系.转染si-NEAT1或共转染si-NEAT1与anti-miR-195至SiHa细胞,克隆形成实验测定细胞存活分数、四氮唑蓝(BTC)法测定细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白印迹(Western blot)检测Cleaved caspase-3蛋白的表达水平.结果 宫颈癌SiHa细胞中NEAT1的表达高于正常宫颈细胞Ect1/E6E7(P<0.05),而miR-195的表达低于正常宫颈细胞Ect1/E6E7(P<0.05).在放射处理(2、4、6、8 Gy)的宫颈癌Si-Ha细胞中,NEAT1的表达量显著升高(P<0.05),而miR-195的表达量显著下降(P<0.05);双荧光素酶报告系统结果显示,NEAT1靶向负调控miR-195的表达.抑制NEAT1表达可抑制宫颈癌SiHa细胞的增殖,并促进其凋亡,增强SiHa细胞的放射敏感性;敲除miR-195则会逆转抑制NEAT1表达对SiHa细胞的增殖、凋亡及放射敏感性.结论 抑制NEAT1可能通过靶向miR-195增强SiHa细胞的放射敏感性,NEAT1有望成为提高宫颈癌临床放射敏感性的分子靶点.