lncRNA MALAT1调控miR-144-3p/ZEB1对肺癌放射敏感性的影响

• 作者: 钟淙 石琴 章超
• 学科: 医学
• 关键词: 肺癌 长链非编码RNA 肺腺癌转移相关转录本1 miR-144-3p E盒结合锌指蛋白1 放射敏感性
• 年，卷（期）: 2022,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 307-314
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13267/j.cnki.syzlzz.2022.052

摘要

目的 探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）肺腺癌转移相关转录本1（metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1，MALAT1）调控miR-144-3p/E盒结合锌指蛋白1（zinc finger E-box binding homeobox 1，ZEB1）对肺癌放射敏感性的影响。方法 采用RT-qPCR检测人正常肺HBE细胞和肺癌A549细胞中MALAT1及miR-144-3p的表达情况。将A549细胞分别设置为A549组（不进行处理）、放射组（6 MV X线垂直照射）、MALAT1沉默对照组（转染阴性对照慢病毒）、MALAT1沉默组（转染sh-MALAT1慢病毒）、过表达对照组（转染过表达对照慢病毒）、miR-144-3p过表达组（转染miR-144-3p模拟物）、MALAT1沉默+沉默对照组（sh-MALAT1慢病毒与沉默对照慢病毒共转染）和MALAT1沉默+miR-144-3p沉默组（sh-MALAT1慢病毒与miR-144-3p抑制剂共转染），经不同剂量（0、2、4、6和8Gy）放射处理，培养48h，集落形成实验测定细胞放射敏感性。以4Gy放射剂量处理各组细胞，培养48h，MTT法检测各组A549细胞增殖情况，流式细胞仪检测A549细胞凋亡情况，双荧光素酶报告基因检测MALAT1、miR-144-3p和ZEB1三者的靶向关系，Western blot检测ZEB1以及增殖和凋亡相关蛋白表达情况。结果 与HBE细胞比较，A549细胞中MALAT1表达水平增加，而miR-144-3p表达水平降低（均P<0.05）。抑制MALAT1或miR-144-3p过表达均增加A549细胞放射敏感性，抑制细胞增殖及c-Myc表达，促进细胞凋亡及caspase-3和Bax表达（均P<0.05）。双荧光素酶报告基因显示，MALAT1与miR-144-3p存在靶向关系，miR-144-3p与ZEB1存在靶向关系。miR-144-3p抑制剂可逆转sh-MALAT1对细胞增殖、凋亡和放射敏感性的影响（均P<0.05）。结论 lncRNA MALAT1沉默通过促进miR-144-3p/ZEB1轴增强肺癌细胞的放射敏感性。