热休克蛋白70C末端反应蛋白对人小细胞肺癌细胞株的作用

• 作者: 李萌 粘婧 李德华
• 来源期刊: 锦州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 小细胞肺癌 hsp70作用蛋白C端 间充质-上皮转化因子
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 25-29,34
• 页数: 6页
• 分类号: R734.2
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨热休克蛋白70C末端反应蛋白(C-terminus of hsp70-interacting protein,CHIP)过表达对MET以及SCLC细胞株凋亡以及侵袭功能的影响.方法 体外培养SCLC细胞株,免疫印迹法检测SCLC细胞系中CHIP,MET的表达关系.用pcDNA3-CHIP(+)和pcDNA3(-)构建的NCI-H69细胞,检测ERK,FAK,pERK1/2,Akt,pFAK,GFP,Myc和paxillin的表达,评价CHIP和MET蛋白的表达.用GFP标记的CHIP和Myc标记的MET表达载体共转染NCI-H69细胞,免疫沉淀方法 检测CHIP与MET的相互作用.最后对CHIP转染的细胞行细胞活力、细胞凋亡和细胞侵袭试验.结果 CHIP与MET在SCLC细胞系中的表达呈反比关系.转染pcDNA3-CHIP(+)后的细胞CHIP蛋白表达升高,同时MET蛋白表达降低.CHIP过表达的肿瘤细胞中的paxillin和FAK活化程度降低.CHIP过表达SCLC细胞株的侵袭能力下降,细胞生长活力明显下降,凋亡水平增加.转染阴性对照载体(-)或CHIP表达载体(+)的NCI-H69细胞中CHIP过表达后MET的聚泛素化水平升高.结论 CHIP抑制MET依赖性信号,调节MET介导的SCLC运动、 凋亡和侵袭.此外,CHIP通过在SCLC细胞系中的过表达,可明显减少细胞侵袭和生长,同时促进细胞凋亡.