唾液特异性mRNA荧光复合检测体系的构建

• 作者: 赵一霞 郝文静 李文 杨栋辉 胡胜 邓锴 季安全 孙启凡
• 来源期刊: 中国法医学杂志
• 学科: 政治法律
• 关键词: 法医物证学 体液斑迹鉴定 mRNA分析 多重PCR复合检测体系 唾液
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 41-46
• 页数: 6页
• 分类号: DF795.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13618/j.issn.1001-5728.2021.01.009

摘要

目的 基于唾液中特异表达的mRNA标记分子,建立五重荧光复合检测系统,实现对唾液的有效鉴定.方法 采集健康志愿者唾液样本,提取样本总RNA,利用终点逆转录-聚合酶链反应(Endpoint Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,Endpoint RT-PCR)技术扩增3个唾液特异mRNA标记分子MUC7、HTN3、STATH和2个管家基因GAPDH、ACTB,通过毛细管电泳分离检测特异性产物,构建起五重mRNA荧光复合检测体系.同时使用100份样本和6份室温晾干1M、6M的唾液斑样本对体系的特异性、重复性和灵敏度进行验证.结果 在40份唾液样本中均检测到唾液mRNA标记分子MUC7、HTN3、STATH以及管家基因GAPDH、ACTB共5个特异性的峰,而在外周血、月经血、精液和阴道分泌物样本中仅检测到管家基因GAPDH、ACTB,检测灵敏度可达2ng总RNA,且在室温晾干1M、6M的唾液斑样本中仍能检测到唾液特异性标记分子.结论 本研究建立五重mRNA荧光复合扩增检测系统可以有效的将唾液与其他4种法医学常见的体液区分.