PERK基因表达干扰对绵羊痘病毒复制影响的研究

• 作者: 武永淑 秦晓东 孙跃峰 张志东 李一经 李彦敏
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 关键词: PERK ER应激 shRNA 绵羊痘病毒
• 年，卷（期）: 2021,（4）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 467-474
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0052

摘要

为探究干扰Hela细胞上PERK基因表达对内质网未折叠蛋白反应(UPRER)的作用及对绵羊瘟病毒(sheep pox virus,SPPV)复制的影响.本研究在HEK293T细胞进行PERK短发夹RNA(shRNA)慢病毒包装并转染Hela细胞,通过实时定量RT-PCR、细胞免疫荧光和Western-blot检测PERK在mRNA和蛋白水平的表达量,同时,用内质网应激激活剂tunicamycin处理shPERK细胞株后检测PERK通路上eIF2α,P-eIF2α,ATF5和ATF4等基因的蛋白表达情况.另外,接种SPPV2于shPERK细胞株,观察干扰PERK表达对病毒复制的影响.结果 ,与空白对照组和阴性对照组相比,慢病毒介导的PERK shRNA成功转柒了Hela细胞;与阴性对照组比较,试验组PERK在mRNA水平和蛋白水平都明显降低,且mRNA水平两者差异极显著(P＜0.001);用tunicamycin处理后,试验组eIF2α,P-eIF2α,ATF4和ATF5基因蛋白表达下调;PERK基因表达干扰后SPPV2的复制减弱,说明PERK在调控SPPV2的复制具有重要作用.以上结果为进一步深入探究UPRER对SPPV2复制的影响及阐明病毒与宿主相互作用的分子机制奠定基础.