1-甲基色氨酸对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞通透性及凋亡的影响

• 作者: 王元元 许铎 沈继龙 周情太 赵慧静 陈亚利 汪明灯
• 来源期刊: 中华急诊医学杂志
• 关键词: 1-甲基色氨酸 脂多糖 脓毒症 内皮细胞 通透性 凋亡
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 59-63
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-0282.2021.01.013

摘要

目的 探讨1-甲基色氨酸(1-methyltryptophan,1-MT)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)通透性及细胞凋亡的影响.方法 将HUVECs分为三组,即磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffered saline,PBS对照组)、1 μg/mL LPS(LPS组)、含有LPS及1 mmol/L 1-MT(1-MT组).采用蛋白免疫印迹试验(Western blot)检测孵育8h后的p120连环(p120 concatemer,pl20ctn)、血管内皮钙粘蛋白(vascular endothelial cadherin,VE-cadherin)、caspase-3及DNA 修复酶多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1(DNA repair enzyme polyadenylate ribose polymerase-1,PARP-1)的表达.采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)分别检测孵育2、4、6和8h 的犬尿氨酸(kynurenine,Kyn)浓度,并计算吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)活性.组间两两均数比较用LSD-t检验.结果 与PBS对照组相比较,LPS组caspase-3[(74.01 ±7.91)％vs(157.14 ±7.63)％,P＜0.01]、Kyn 表达显著增高,而pl20ctn[(49.12 ±2.15)％vs(37.61 ± 1.80)％,P＜0.01]、VE-cadherin[(107.70±7.01)％vs(90.66±2.58)％,P=0.027]及抗凋亡蛋白PARP-1[(67.95 ±3.08)％vs(57.93 ±5.26)％,P=0.038]水平显著降低,IDO活性升高(P＜0.05).与LPS 组比较,1-MT 组caspase-3[(157.14 ±7.63)％vs(110.74 ± 7.89)％,P＜0.01]表达显著降低,然而 pl20ctn[(37.61 ± 1.80)％vs(47.19 ± 0.82)％,P＜0.01]、VE-cadherin[(90.66 ± 2.58)％vs(107.27 ±9.89)％,P=0.029]及 PARP-1[(57.93 ± 5.26)％vs(74.12 ±4.90)％,P=0.005]表达显著升高,不同时间点IDO活性均降低(P＜0.05).PBS组和1-MT组pl20ctn、VE-cadherin、PARP-1蛋白水平、Kyn浓度及IDO活性差异无统计学意义(P＞0.05),1-MT组caspase-3蛋白水平较PBS组升高(P=0.001).结论 LPS刺激HUVECs通透性增加,而1-MT可通过抑制IDO活性和降低Kyn水平拮抗LPS的刺激作用,此外,1-MT还可降低细胞凋亡,其机制可能是通过增加PARP-1表达,降低caspase-3水平,从而发挥内皮细胞的保护作用.