PFKFB3抑制剂减轻高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化

• 作者: 牛津 张敏 王巧娟 刘振华 顾晓明 冯娜 张淑苗 贾敏 樊荣 李娟 裴建明
• 来源期刊: 心脏杂志
• 关键词: PFKFB3 血管钙化 血管平滑肌细胞 糖酵解
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 117-122
• 页数: 6页
• 分类号: R54
• 语种: 中文
• DOI: 10.12125/j.chj.202104010

摘要

目的 探究果糖-2,6-二磷酸酶3(6-bisphosphatase 3,PFKFB3)抑制剂3-PO对高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)钙化的作用及其潜在机制.方法 将原代培养的VSMC随机分为:对照(Con)组、高磷诱导(β-GP)组、高磷诱导+3-PO(β-GP +3-PO)组、对照+乳酸钠(Con +Lactate)组、对照+乳酸钠+3-PO(Con +Lactate+3-PO)组.实验前后用微板法检测细胞内钙和碱性磷酸酶(ALP)含量;茜素红染色检测VSMC钙化程度;CCK 8试剂盒检测细胞活力;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测表型转化相关蛋白(RUNX2,BMP-2,SM22a)及糖酵解相关蛋白(PFKFB3,HKⅡ,GLUT1与GLUT4)表达水平,比色法检测乳酸含量及乳酸脱氢酶(LDH)活力.结果 与Con组比较,β-GP组VSMC钙化程度及成骨蛋白表达显著增加(P＜0.01),细胞活力显著降低(P＜0.01),而给予3-PO可显著逆转β-GP组的VSMC表型转化蛋白的表达变化(P＜0.05),并使细胞活力增加(P＜0.01).进一步的研究证实,β-GP组中PFKFB3表达水平,乳酸含量及LDH活力显著增加(P＜0.01),而在β-GP +3-PO组中显著下调(P＜0.01),其余糖酵解蛋白表达水平未明显改变.另外,乳酸钠也可引起VSMC钙化程度及表型转化蛋白表达的增加(P＜ 0.01),给予3-PO可逆转乳酸钠引起的VSMC钙化和表型转化(P＜0.05).结论 PFKFB3抑制剂3-PO可能通过降低PFKFB3表达抑制糖酵解水平,从而抑制了高磷诱导的VSMC的钙化,研究结果为临床治疗血管钙化提供了潜在的药物靶点.