多房棘球绦虫主要卵抗原重组蛋白的制备及其在免疫诊断中的初步应用

• 作者: 张军梅 李瑞 陈晓倩 何学东 王正荣 郑亚东 胡俊杰 郭小腊
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 关键词: 多房棘球绦虫 主要卵抗原 免疫组织定位 免疫诊断
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 588-593
• 页数: 6页
• 分类号: S852.734
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0073

摘要

通过对多房棘球绦虫(Echinococcus multiloculais)主要卵抗原(EmMEA)基因的表达、抗体制备及血清ELISA检测,初步评价其作为诊断抗原的价值.根据WormBase数据库EmMEA基因序列设计引物,利用RT-PCR扩增EmMEA基因并构建重组表达质粒,诱导表达、纯化重组蛋白EmMEA;制备EmMEA多克隆抗体并进行免疫组织定位;ELISA方法检测EmMEA重组抗原的敏感性和特异性.结果表明,EmMEA基因长度为957 bp,编码319个氨基酸,与其它绦虫中同源蛋白的氨基酸相似性为90.85％～96.93％.EmMEA重组蛋白约为40 ku,制备的多克隆抗体可识别虫体天然EmMEA蛋白,抗体效价达1:25 600;EmMEA蛋白仅分布于原头蚴体壁.ELISA检测表明,EmMEA重组抗原和虫体天然抗原的特异性均为100％,EmMEA重组抗原的敏感性(100％)优于虫体天然抗原的敏感性(95.83％).结合以上研究结果,EmMEA抗原具有作为多房棘球蚴病诊断抗原的潜能.