快速诱导细胞凋亡方法探讨

• 作者: 朱雪梅 李艳梅 卫林
• 来源期刊: 河南师范大学学报（自然科学版）
• 关键词: 细胞凋亡 流式细胞术 Annexin V-PE/7-AAD
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 生物与水产学
• 页码范围: 80-86
• 页数: 7页
• 分类号: R3923
• 语种: 中文
• DOI: 10.16366/j.cnki.1000-2367.2021.02.011

摘要

[目的]利用流式细胞仪检测细胞凋亡在基础研究、疾病诊断及预后预测及评价中具有重要的应用价值.补偿调节所需的单阳染色管的制备,是流式细胞术检测凋亡过程的一个重要步骤.探讨了快速诱导不同细胞系和原代细胞凋亡的方法,优化用于检测细胞凋亡的流式单阳染色管快速制备.[方法](1)分别用100 μmol/L H2O2、体积分数4％多聚甲醛、75％乙醇和反复冻融的方法处理293T细胞15 min、30 min、1h,Annexin V-PE/7-AAD双标记流式检测293T细胞凋亡率.(2)体积分数1％乙醇、5％乙醇、10％乙醇和20％乙醇处理293T细胞、RAW264.7细胞、HeLa细胞、T细胞和B细胞1 min,流式细胞仪检测细胞凋亡情况.[结果](1)293T细胞经100 μmol/L H2O2、体积分数4％多聚甲醛、75％乙醇和反复冻融法处理后,几乎所有细胞均处于凋亡状态.(2)293T细胞、RAW264.7细胞、T细胞和B细胞用1％乙醇处理1 min,HeLa细胞用20％乙醇处理1 min,可出现较明显的凋亡现象.[结论]细胞凋亡实验时,根据细胞的生长特性,可选择体积分数1％～20％的乙醇诱导1 min,作为制备单阳染色管的最佳方案.