3种不同Protein A亲和层析填料纯化抗CD52单克隆抗体的比较

• 作者: 南建军 秦海艳 宋宪铭 安晨 宋兰兰 赵晓瑞 陈继军
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 工学
• 关键词: 亲和层析填料 载量 抗CD52单克隆抗体 纯化效果
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 78-83
• 页数: 6页
• 分类号: TQ460.6
• 语种: 中文

摘要

目的 比较3种Protein A亲和层析填料MabSelect SuRe、Protein A Diamond及UniMab 50纯化抗CD52单克隆抗体的载量及纯化效果.方法 将浓度为1.24 mg/mL的抗CD52单克隆抗体分别流经3种Protein A亲和层析填料,确保保留时间一致,检测流穿液的抗体浓度,以流穿液中抗体浓度达10％上样浓度时的上样量确定填料的最大动态载量.3种填料均按80％最大载量上样,纯化3 批抗CD52单克隆抗体培养上清样品,比较洗脱体积、抗体回收率及洗脱收集液中抗体浓度、抗体纯度、电荷异质性、宿主蛋白残余量、宿主DNA残余量、填料配基Protein A脱落量.结果 填料MabSelect SuRe 与Protein A Diamond在载量、宿主蛋白残余量、填料配基Protein A脱落量方面接近;在抗体纯度、电荷异质性、宿主DNA残余量方面,3种填料表现相当;在抗体回收率、洗脱体积及抗体浓度方面,UniMab 50表现最佳.结论 3 种填料亲和纯化抗CD52单克隆抗体的效果各有优劣,但均可满足该纯化步骤的要求,可根据实际工艺状况及质控要求进行选择.