齐整小核菌内源小核菌胶水解酶的挖掘及其功能验证

• 作者: 曾伟主 谭润卿 周景文
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: 齐整小核菌 硬葡聚糖 葡聚糖酶 分子量 多糖水解
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 工业生物技术
• 页码范围: 207-217
• 页数: 11页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13345/j.cjb.200236

摘要

小核菌胶是一种高分子水溶性微生物胞外多糖,主要用于石油开采、食品加工、医药制造和化妆品等领域.由微生物发酵法生产的小核菌胶分子量较高,存在溶解性低、粘度高和分散性差等问题,对提取、保存和应用带来了一系列困难.研究用于改性小核菌胶分子量的降解方式对扩大小核菌胶的工业应用具有重要意义.文中以齐整小核菌Sclerotium rolfsii WSH-G01为对象,通过基因组测序从全基因组范围内对菌株葡聚糖降解酶基因进行功能注释,设计可能引起β-葡聚糖酶差异表达的培养体系,结合转录组学分析,挖掘菌株内源β-葡聚糖酶,对可能的多糖水解酶进行功能验证.将获得的14个可能的内源小核菌胶水解酶基因进行扩增,在毕赤酵母Pichia pastoris中进行异源表达,经SDS-PAGE验证和酶活测定,得到10个可溶性蛋白,其中5个具有昆布多糖水解活性.这5个内源水解酶中,GME9860具有对小核菌胶的酶解效果.研究结果为应用酶水解法获取中低分子量小核菌胶以及代谢工程改造调控齐整小核菌发酵生产不同分子量小核菌胶提供了参考.