牛坏死杆菌43K OMP单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 贺显晶 张思瑶 蒋剑成 王丽娜 肖佳薇 汪锋锋 孙东波 郭东华
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 坏死杆菌 牛 43KOMP 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 89-92
• 页数: 4页
• 分类号: S855.1+2
• 语种: 中文

摘要

目的 制备牛坏死杆菌43KOMP单克隆抗体,并鉴定其生物学特性.方法 经IPTG诱导表达重组43KOMP,纯化后免疫BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选分泌抗43K OMP特异性抗体的杂交瘤细胞,制备腹水,对抗43K OMP单克隆抗体进行效价、亚类、免疫原性及特异性鉴定.结果 获得3株稳定表达抗43K OMP单克隆抗体的杂交瘤细胞株,取其中效价最高的1 株命名为043,其重链为IgG1,轻链为κ链,上清和腹水效价分别为1∶25 600和1∶105;该单克隆抗体可与重组43K OMP发生特异性反应,且与转染后瞬时表达43K OMP 的BHK-21细胞特异性结合,发生荧光反应.结论 成功表达并纯化了 43KOMP,制备了牛坏死杆菌43KOMP单克隆抗体,为研究坏死杆菌的感染机制及发病机理奠定了基础.