miR-203a通过靶向抑制CDK6调控膀胱癌细胞增殖及放射敏感性

• 作者: 王磊 乔庆东 黄海航 李浩然 何云峰
• 来源期刊: 中华放射肿瘤学杂志
• 关键词: miR-203a 细胞周期蛋白依赖性激酶 放射敏感性 膀胱癌细胞系
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 物理·技术·生物
• 页码范围: 191-197
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn113030-20200623-00319

摘要

目的:探讨miR-203a在膀胱癌(BC)细胞系(RT-112、T24、5637、UM-UC-3细胞)中的表达及对细胞增殖及放射敏感性的影响。方法:将miR-203a mimics、miR-203a inhibitor、CDK6 siRNA、CDK6表达质粒及相应阴性对照(NC)转染入BC细胞中。实时荧光定量PCR检测miR-203a在RT-112、T24、5637、UM-UC-3细胞和人膀胱上皮永生化细胞系(SV-HUC-1)中的表达。CCK8实验研究miR-203a和CDK6对BC细胞系增殖的调控。克隆形成实验研究miR-203a和CDK6对BC细胞系放射敏感性的影响。荧光素酶报告基因实验验证miR-203a的靶基因。蛋白印迹法检测miR-203a对CDK6蛋白表达的影响。采用单因素方差分析进行多组间比较、 t检验进行两组间比较。 结果:与SV-HUC-1细胞相比，miR-203a在RT-112、T24、5637、UM-UC-3细胞中的表达明显降低( P<0.05)。与NC相比，过表达miR-203a抑制BC细胞系增殖( P<0.05)，敲低miR-203a促进BC细胞系增殖( P<0.05)。与NC相比，过表达miR-203a增加BC细胞系的放射敏感性( P<0.05)，敲低miR-203a减弱BC细胞系的放射敏感性( P<0.05)。CDK6是miR-203a的作用靶点。与NC组相比，过表达miR-203a显著降低了CDK6蛋白水平( P<0.05)，敲低miR-203a显著上调了CDK6蛋白水平( P<0.05)。在转染miR-203a mimics的T24和UM-UC-3细胞中过表达CDK6后，与miR-203a mimics组相比，细胞增殖能力升高、放射敏感性降低( P<0.05)；在转染miR-203a inhibitor的RT-112和5637细胞中沉默CDK6后，与miR-203a inhibitor组相比，细胞增殖能力降低、放射敏感性升高( P<0.05)。 结论:miR-203a在BC细胞系中低表达，可作为抑癌基因抑制BC细胞系增殖和增强放射敏感性。