酰基甘油激酶敲低对结直肠肿瘤细胞HCT116增殖迁移的影响

• 作者: 高娜娜 贾平平 石汉平
• 来源期刊: 肿瘤代谢与营养电子杂志
• 关键词: 酰基甘油激酶 敲低 人结直肠肿瘤细胞 增殖 迁移
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 论著|Original Articles
• 页码范围: 62-66
• 页数: 5页
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨AGK敲低对人结肠肿瘤细胞HCT-116增殖、迁移的影响.方法 本实验通过构建AGK基因的shRNA沉默慢病毒质粒,利用第二代慢病毒包装系统制备、浓缩慢病毒液,并感染人结肠肿瘤细胞HCT-116细胞株.经过嘌呤霉素抗性筛选获得敲低AGK基因的HCT-116细胞系.利用qRT-PCR和Western blotting检测AGK敲低后在mRNA水平和蛋白水平表达情况;利用CCK-8试剂盒检测AGK敲低稳定细胞株细胞增殖情况;利用划痕实验检测AGK敲低后对细胞迁移的影响.结果 本实验构建的AGK基因的shRNA沉默慢病毒质粒可以有效敲低HCT116中内源性AGK.同野生型细胞株相比,AGK敲低稳转株HCT116-ASR-876和HCT116-ASR-878细胞中AGK的mRNA水平和蛋白水平表达显著地降低(P＜0.001).通过CCK-8检测发现,AGK敲低后显著降低细胞增殖能力(P＜0.05).划痕实验表明,AGK敲低能显著抑制细胞迁移作用.结论 shRNA慢病毒感染后,HCT-116细胞中AGK基因的表达量显著低于野生型细胞株,并且初步验证了AGK可以促进HCT116细胞的增殖和迁移.