鸭甲肝病毒1型和3型HRM检测方法的建立

• 作者: 董嘉文 李林林 张俊勤 黄允真 孙敏华
• 来源期刊: 广东畜牧兽医科技
• 关键词: 鸭甲肝病毒1型 鸭甲肝病毒3型 HRM
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 88-91
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8567.2021.03.021

摘要

本研究根据鸭甲肝病毒1型(DHAV-1)和3型(DHAV-3)的5′UTR基因的保守区域,设计了1对特异性的引物,扩增目的片段大小约为199 bp.通过优化反应条件,建立了基于高分辨率熔解曲线(HRM)分析的鸭甲肝病毒1型和鸭甲肝病毒3型的鉴别检测方法.特异性试验结果表明,该方法能特异性地检测出DHAV-1和DHAV-3,检测其它常见鸭源病毒不能形成特异性的熔解峰;敏感性和重复性试验表明,对p-DHAV-1和p-DHAV-3阳性质粒的最低检测限分别为220 copies和28 copies,对不同批次的样品扩增效果良好,具有良好的批内和批间重复性.采用该方法检测临床样品,与传统的二重PCR方法比较,符合率为100％.该方法为DHAV-1和DHAV-3的临床疑似病例的鉴别检测、快速诊断以及分子流行病学调查等提供了技术支撑.