MicroRNA-34a通过下调Notch1的表达促进心肌细胞凋亡

• 作者: 潘嘉林 林丛 周莉莉 黄明远 陈晔
• 来源期刊: 温州医科大学学报
• 关键词: microRNA-34a 心肌细胞 Notch1 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2021,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 394-398,403
• 页数: 6页
• 分类号: R541
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-9400.2021.05.009

摘要

目的:探讨microRNA-34a(miR-34a)对心肌细胞凋亡的影响及其机制.方法:体外培养大鼠心肌细胞H9C2,分别转染miR-34a mimics、miR-34a inhibitor、随机合成的miR-NC片段、Notch1的siRNA、随机合成的siRNA-NC片段,将实验分为6组:normal组、miR-34a组、miR-inhibitor组、miR-NC组、miR-inhibitor+siRNA-Notch1组和miR-inhibitor+siRNA-NC组.RT-qPCR检测各组miR-34a的表达量,Western bolt技术检测各组中caspase-3和Notch1的表达量,流式细胞技术检测各组细胞的凋亡率.双荧光素酶报告实验鉴定Notch1为miR-34a的靶基因.结果:双荧光素酶报告实验证实miR-34a和Notch1间存在靶向关系.与miR-NC组比较,miR-34a组的miR-34a和caspase-3的表达量明显增多,Notch1的表达量明显减少,细胞凋亡率明显升高(P<0.01).与miR-NC组比较,miR-inhibitor组的miR-34a和caspase-3的表达量明显减少,Notch1的表达量明显增多,细胞凋亡率明显减低(P<0.01).与miR-inhibitor+siRNA-NC组比较,miR-inhibitor+siRNA-Notch1组的Notch1的表达量明显降少,caspase-3的表达量明显减少,细胞凋亡率明显减低(P<0.01).结论:miR-34a促进心肌细胞凋亡,其作用机制与靶向负调控Notch1有关.